“PRUEBAS CUALITATIVAS PARA LA IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS”

Introducción. Los carbohidratos o también llamados  glúcidos, hidratos de carbono o sacáridos, son elementos principales en la alimentación, que se encuentran principalmente en azucares, almidones y fibra. La función principal de los carbohidratos es el aporte energético. Son una de las sustancias principales que necesita nuestro organismo. (Pabón, 2011)

Los carbohidratos son compuestos orgánicos formados por carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos forman parte e intervienen en una gran cantidad de procesos de los seres vivientes. Los más importantes son de tres tipos: energéticos, de reserva y estructurales. Desde el punto de vista energético uno de los carbohidratos más sencillos, la glucosa constituye el material de más rápido aprovechamiento en el organismo y su oxidación satisface las necesidades energéticas y calóricas del mismo. (Medina, 2011).

Como materiales de reserva, los carbohidratos existen en reino vegetal en forma de almidones y en el reino animal en forma de glucógenos; tanto uno como el otro son susceptibles de convertirse en glucosa para poder ser utilizados. Y en el aspecto estructural, los carbohidratos llevan a cabo una importante función en los vegetales debido a que la célula, que es su estructura leñosa o esqueleto, está constituida por cadenas de azúcares simples. En los animales también sucede lo anterior, así tenemos que el exoesqueleto de muchos artrópodos está constituido también por cadenas de carbohidratos simples. (Mancillas, Cuevas y Sánchez, 2009)

El objetivo de la práctica fue detectar la presencia de carbohidratos que se hallen presentes como monosacaridos, oligosacaridos o polisacáridos.

Metodología. En esta práctica se desarrollaron cinco experimentos, en los cuales a continuación se muestra la metodología empleada:

Tabla. 1. Prueba del timol para carbohidratos.

Solución	Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
Glucosa 30mg	x
Lactosa 30mg		x
Nacl 30mg			x
Agua destilada	2ml	2ml	2ml
Sol. Alcoholica timol 5%	3 gotas	3 gotas	3 gotas
H2SO4	0.5 ml	0.5 ml	0.5 ml

*No agitar los tubos después de ingerir las soluciones

Tabla 2. Prueba de ácido nicromico para carbohidratos.

Solución	Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
Glucosa 30mg	x
Lactosa 30mg		x
Nacl 30mg			x
Agua destilada	3ml	3ml	3ml
HNO3	3ml	3ml	3ml
Sol. Cromato de potasio al 5%	5 gotas	5 gotas	5 gotas

*Se dejo reposar  dos minutos después de haber agregado las soluciones

Tabla 3. Prueba del ácido fosfórico para cetosacaridos.

Solución	Tubo 1	Tubo 2
Sacarosa 30mg	x
Glucosa 30mg		x
Acido fosfórico al 85%	1ml	1ml

*Se agitaron los tubos y se sometieron a baño maría durante un minuto.

Tabla 4. Prueba de Molish.

Solución	Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
Glucosa al 1%	2ml
Fructosa al 1%		2ml
Agua destilada			2ml
Reactivo de Molish	5 gotas	5 gotas	5 gotas
H2SO4	2 ml	2ml	2 ml

*Antes de agregar el H2SO4 se mezclaron los tubos

Tabla. 5. Prueba de lugol para almidon y glucógeno

Solución	Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
Glucosa al 1%	2ml
Fructosa al 1%		2ml
Almidon al 1%			2ml
HCL concentrado	3gotas	3 gotas	3 gotas
Lugol	1 gota	1 gota	1 gota

*Después de agregar las soluciones se mezclo cada tubo.

Resultados y discusión.

4.1 Prueba de timol para carbohidratos.

Tabla 1. Resultados de la prueba de timol

Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
(+)	(+)	(-)

4.2 Prueba de ácido nicromico para carbohidratos.

Tabla 2. Resultados de la prueba del ácido nicromico

Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
(+)	(+)	(-)

4.3 Prueba del ácido fosfórico para acetosacaridos.

Tabla 3. Resultados de la prueba de ácido nicromico

Tubo 1	Tubo 2
(+)	(-)

(Maraculla, 1981). Los azucares reductores como las aldosas y cetosas forman con fenilhidrazina compuestos de estructura cristalina característica, llamados osazonas. El acido fosfórico puede unirse tanto a los hidroxilos alcohólicos como a los hemiacetilicos de los azucares. Las formas biológicamente activas de los glúcidos suelen ser esteros fosfóricos.

La sacarosa o azúcar común es un disacárido que está formado por una unidad de glucosa y otra de fructosa.

4.4 Prueba de Molish

Tabla. 4. Resultados de la prueba de Molish

Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
(+)	(+)	(-)

(Enríquez, 2013). La reacción de Molish permite destacar la presencia de hidratos de carbono en una muestra; este se basa en la acción hidrolizante y deshidratante que ejerce el acido sulfúrico sobre estos compuestos. Como se sabe, los ácidos concentrados originan una deshidratación de los azucares para rendir furfurales, que son derivados aldehidicos de furano.

4.5 Prueba de lugol para almidón y glucógeno

Tabla 5. Resultados de la prueba de lugol.

Tubo 1	Tubo 2	Tubo 3
(-)	(-)	(+)

(Enríquez, 2013). La reacción del lugol es un método que se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con el reactivo de lugol toma un color azul-violeta característico. Esa coloración producida por el lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula del almidón. Por lo tanto, no es una verdadera reacción química, si no que forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul violeta. Este complejo es sensible a la temperatura. Ya que si se calienta el tubo, el color desaparece. Esto se debe a que las espiras del almidón se desarman, por asi decirlo y el yodo se libera. Una vez frio las espiras se reorganizan y se vuelve a ver el color.

Conclusiones. En esta práctica aprendimos a identificar carbohidratos presentes  y no presentes con diferentes pruebas como la prueba de timol, prueba de ácido nicromico, prueba del ácido fosfórico, prueba de Molish y la prueba de lugol para almidón y glucógeno, en esta práctica si se concluyó con los resultados esperados.

Cuestionario.

1¿Qué son los azucares reductores?

Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas

2. ¿Cuales son los componentes del almidón?

El almidón está constituido por dos moléculas, amilosa y amiopoectina,y ambas partes están conectadas por uniones glicosidicas. Las moléculas de amilosa suponen aproximadamente la cuarta parte del almidón.

3. ¿Cual es la función del ensayo de Barfoed?

Prueba de Barfoed es un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos. Se basa en la reducción de cobre (En forma de acetato) a cobre (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo. Esta prueba fue descrita por primera vez por el químico danés Christen Barfoed y se utiliza principalmente en botánica. Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta.

Prueba de Barfoed ensayo monosacáridos.

4. ¿Cuál es la función de la glucoquinasa?

La glucocinasa es una enzima que facilita la fosforilación de glucosa en glucosa-6 fosfato-. La glucoquinasa se produce en las células en el hígado, el páncreas, el intestino y el cerebro de los seres humanos y la mayoría de otros vertebrados. En cada uno de estos órganos que desempeña un papel importante en la regulación del metabolismo de hidratos de carbono al actuar como un sensor de glucosa, provocando cambios en el metabolismo o la función de la célula en respuesta a la subida o caída de los niveles de glucosa, como ocurre después de una comida o durante el ayuno. Las mutaciones del gen para esta enzima pueden causar formas poco comunes de la diabetes o la hipoglucemia.

5. En la prueba de lugol solo se puede identificar almidón ¿Por qué? ¿En que parte de su estructura actúa?

El almidón reacciona químicamente con iodo para producir un color azul obscuro cuando las moléculas de iodo se insertan en los huecos de las moléculas.

6. Menciona 2 carbohidratos de función estructural

Celulosa Lignina y Hemicelulosa

7.¿En qué consiste la prueba de Bial?

Esta reacción permite reconocer pentosas glúcidos de 5 carbonos y sustancias que las contengan. Se basa en la formación de un compuesto furfurico que se condensa con el orcinol del reactivo.

8.¿Cual es el producto de la oxidación aeróbica de la glucosa?

36-38 ATP

9.¿Cuál es el mecanismo de transporte por el cual la glucosa ingresa a las células para su oxidación?

10. La prueba de Molish es una determinación colorimétrica, en donde se evidencia la presencia del carbohidrato con un color purpura. ¿A qué se debe esto?

Se basa en la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosidicos de la muestra y la deshidratación a furfural en las pentosas o hidroximetilfurfural en las hexosas.

Referencias Bibliográficas.

Conn, E. E. y Stumpf, P.K (1993). Bioquimica fundamental. (Ed. 3ra.) Mexico: Editorial Limusa, S.A. de C.V.  pág. 57

Enríquez (2013). Informe de extracción e identificación de carbohidratos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://es.slideshare.net/sextobtres/informe-de-extraccion-e-identificacin-de-carbohidratos

Mancillas, Cuevas y Sánchez (2009). Carbohidratos Cor. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://es.slideshare.net/puerkito_xtreme/carbohidratos-cor

Maraculla, J. M. (1981) Biomoleculas: Lecciones de bioquímica estructural. (Ed. 2da). España: Editorial Reverte, S.A. pág. 42 y 53

Medina (2011). Pract Identificación de carbohidratos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://es.scribd.com/doc/65839199/Pract-Identificacion-de-Carbohidratos#scribd

Morales (2005). Reconocimiento de los monosacáridos, disacáridos y de los polisacáridos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf

Ríos (2009). Carbohidratos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de Lafuente http://carbohidratosdaniel.blogspot.mx/

Pabón (2011). Identificación de carbohidratos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://uni-biologia.blogspot.mx/2011/01/identificacion-de-carbohidratos.html

Quiñones (2004). Identificación de carbohidratos y proteínas. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://lls.ulat.ac.pa/archivos/vrodrig_8-352-694/Archivos_de_Cursos/Materia_-_EFI002-Biologia_I_Grupo_-_1_Anio_-_2011-1/BQMA-SIB2.PDF

Vallejo (2013). Identificación de carbohidratos a través de reactivos. Recuperado el 6 de abril de 2015 de la fuente http://www.academia.edu/6347596/Identificaci%C3%B3n_de_Carbohidratos_a_trav%C3%A9s_de_reactivos